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No final dos anos 60 a Galeria de São Mamede abriu as portas muito próximo do Largo do Rato, na Rua da Escola Politécnica, num edifício pombalino, quase em frente à Procuradoria Geral da República e da Igreja de São Mamede
Sempre se dedicou exclusivamente ao modernismo e ao movimento contemporâneo portugueses, com exibições pontuais de artistas estrangeiros. Tem tido uma actividade artística intensa e de qualidade, apoiada em artistas "clássicos" que sempre estiveram ligados à Galeria, (como por exemplo, Areal, Cesariny, Cruzeiro Seixas ou Júlio) mas também, e sobretudo, em artistas novos.
Em 2005 expandiu-se para a cidade do Porto e em 2007 alargou as instalações em Lisboa, voltando a ocupar a totalidade do espaço original que a celebrizou.